澱粉酶測定的方法是什麼

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澱粉酶測定的方法是什麼

植物中的澱粉酶能將貯藏的澱粉水解成麥芽糖。澱粉酶幾乎存在於所有植物中,其中以禾穀類種子的澱粉酶活性最強。植物中有α–澱粉酶和β–澱粉酶,其活性因植物的生長髮育時期不同而有所變化。通過本實驗掌握澱粉酶的提取和測定方法。

原理:

α–澱粉酶和β–澱粉酶,各有其一定的特性,如β–澱粉酶不耐熱,在高温下易鈍化,而α–澱粉酶不耐酸,在pH3.6以下則發生鈍化。通常提取液中同時有兩種澱粉酶存在,測定時,可根據它們的特性分別加以處理,鈍化其中之一,即可測出另一酶的活性。將提取液加熱到70℃維持15min以鈍化β–澱粉酶,便可測定α–澱粉酶的活性。或者將提取液用pH3.6之醋酸在0℃加以處理,鈍化α–澱粉酶,以求出β–澱粉酶的活性。

澱粉酶水解澱粉生成的麥芽糖,可用3,5–二硝基水楊酸試劑測定。由於麥芽糖能將後者還原生成3–氨基–5–硝基水楊酸的顯色基團,在一定範圍內其顏色的深淺與糖的濃度成正比,故可求出麥芽糖的含量。以單位重量樣品在一定時間內生成的麥芽糖的量表示酶活力。

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