求原核表達詳細步驟

基本步驟：

目的基因的擴增、載體與目的基因雙酶切、電泳、割膠回收、目的基因與載體的連接反應、重組體篩選、驗證重組體、轉化入大腸桿菌進行表達。

問題在於：目的基因如何獲取，擴增策略的決定，表達載體的選擇，雙酶切選擇哪一對限制性內切酶，如何篩選重組體等等。