求問引物合成的具體實驗步驟
來源:生活大全幫 1.61W
引物合成的具體實驗步驟:
1、脱掉附加在CPG擔體上的第一個鹼基5羥基基團上的保護基,準備附加下一個新的鹼基;
2、活化新的鹼基單體,準備與第一個鹼基進行反應;
3、第二個鹼基與第一個鹼基發生偶聯反應;
4、將沒有反應的第一個鹼基的5羥基加帽封死,使其不再進一步參與反應;
5、將核苷亞磷酸酯氧化成更穩定的核苷磷酸酯。
6、重複進行第一步到第五步的循環,直至合成完所需的Oligo DNA序列。
7、合成結束後,將Oligo DNA分子從CPG上切下,再進行進一步的純化。