求問引物合成的具體實驗步驟

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求問引物合成的具體實驗步驟

引物合成的具體實驗步驟:

1、脱掉附加在CPG擔體上的第一個鹼基5羥基基團上的保護基,準備附加下一個新的鹼基;

2、活化新的鹼基單體,準備與第一個鹼基進行反應;

3、第二個鹼基與第一個鹼基發生偶聯反應;

4、將沒有反應的第一個鹼基的5羥基加帽封死,使其不再進一步參與反應;

5、將核苷亞磷酸酯氧化成更穩定的核苷磷酸酯。

6、重複進行第一步到第五步的循環,直至合成完所需的Oligo DNA序列。

7、合成結束後,將Oligo DNA分子從CPG上切下,再進行進一步的純化。

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