引物是怎麼合成的

1、將預先連接在固相載體上的活性基團被保護的核苷酸與三氯乙酸反應，脱去其5羥基的保護基團DMT，獲得遊離的5羥基。

2、合成DNA的原料，亞磷酰胺保護核苷酸單體，與活化劑四氮唑混合，得到核苷亞磷酸活化中間體，它的3端被活化，5羥基仍然被DMT保護，與溶液中游離的5羥基發生縮合反應。

3、帶帽反應，縮合反應中可能有極少數5羥基沒有參加反應，用乙酸酐和甲基咪唑終止其後繼續發生反應，這種短片段可以在後續環節根據實驗需要來選擇純化方式分離掉。

4、在氧化劑碘的作用下，亞磷酰形式轉變為更穩定的磷酸三酯。這樣即可合成引物。